张晓婷;庄赟;萧凯庭;周碧燕
山西农业大学高寒区作物研究所;广东省湛江市雷州市乌石镇人民政府;广州华夏职业学院教育学院4.华南农业大学园艺学院
摘要:冷响应转录因子ICE在植物的抗寒机制中发挥着重要作用。以‘怀枝’荔枝为材料,克隆获得LcICE1,基因全长共2 242 bp,开放阅读框共1 614 bp,编码537个氨基酸,包含bHLH结构和3个功能位点。通过进化树分析发现LcICE1与龙眼DlICE1相似度最高,说明二者亲缘关系较近;通过ProtParam预测、信号肽、蛋白预测和二级结构预测分析发现,LcICE1可能存在二硫键,为非分泌蛋白,定位于细胞核中,且不存在跨膜结构域,α–螺旋作为蛋白中的大量结构元件分布于整个肽链中;NetPhosk3.1 Server预测显示LcICE1蛋白有4个糖基化位点和49个磷酸化位点。沉默LcICE1增加了低温胁迫下‘妃子笑’荔枝愈伤组织的褐化程度,即愈伤组织的抗寒性降低。进一步的低温处理结果显示,空白对照和p CAMBIA1301-Empty的荔枝愈伤组织比LcICE1过表达的愈伤组织积累更多的超氧阴离子和H2O2,即LcICE1过表达可以增强荔枝愈伤组织的抗寒性。
关键词:荔枝; LcICE1; 低温胁迫; 功能分析